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ELISA试剂盒常见问题与解析

2025-05-21

1、一个ELISA试剂盒检测几个样品?

1)48T 可做42个样本加6个标准曲线;96T 可做90个样本加6个标准曲线

2)以96T试剂盒来算,定量的试剂盒一般可以做90个左右的样品,定性的试剂盒可以做94个左右的样品

3)96T的ELISA试剂盒,去除标准品复孔检测,最多还能检测80个标本;48T的最多30个样本。

2、elisa试剂盒96T的能做检测多少血清样品?板能重复利用吗?

96T,一般做复孔的话,做标准曲线需要16个孔,剩下80个孔就可以做40个样本。这个板不能重复利用。而且配套的试剂也只是够一块板子用的。

3、想请教一下,我想用elisa法测血清里的一种抗原,查了资料,发现没有现成的试剂盒用,现在就有2种备选方案,一种是买抗体对自己包被(查了R&D等大公司都没有可用于elisa的单抗)。哪种比较好呢?自己包被的会不会比国产的试剂盒可靠呢?

如果你觉得技术不错有队其他公司不放心,可以自己购买抗体对自己包被,这个就是麻烦点,自己包被用着放心,舒心;

另外国内还是有一些资质不错的公司,如北京达科为,上海巧伊,依科赛,深圳欣博盛等等

4、western 和ELISA 处理样本有何差别?

Western Blot 样品制备要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制剂),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm离心15min,取上清分装,即得到蛋白样品。建议直接电泳,多余的-80保存。建议分装的蛋白每支略多于一次上样量,一次性用完一支,避免反复冻融。

ELISA样品,直接脑组织冰上匀浆,收集于EP管,同上一样离心,大约220-250ul每支分装(因为ELISA上样量基本都是每孔100ul,做复孔,每个样品2孔,就需要200ul,为了避免不够2孔,分装时要大于200ul每支),直接实验。多余的-80保存,一样避免反复冻融。

不过ELISA最好少量样品进行预实验,或者查阅文献,看看大概组织里有多高浓度,选择合适的试剂盒,测量范围要与组织浓度相符。避免浓度过高测量不准,或者浓度过低,小于试剂盒最低可测浓度。

5、Elisa试剂盒该买哪家公司的呢?

提出这个问题的朋友其实该打,目前国际上各个品牌的试剂盒生厂商,都会有其偏重点,像R&D在细胞因子方面的试剂盒就非常牛逼,而其他牌子也一样的。

Bender:粘附分子方面的试剂盒;

Cayman:花生四烯酸类产品的试剂盒;

Merck(Linco):内分泌研究方面的试剂盒;

Tips:

1、买Elisa试剂盒时,尽量先查文献,通过文献找品牌,再找供应商,找供应商就找正规代理商,千万不要去干“赔夫人又折兵”的蠢事。

2、ELISA中,复孔就是同一个样品加到至少两个孔中(一般3个或4个),最后取其平均值作为样品的读数,这样测得的结果才有说服力!

做复孔是为了较好的较少组内差异,如果血清不足不做复孔也可以。



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