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人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA Kit试剂盒
人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA Kit试剂盒
品牌:CK-E10504
货号:CK-E10504
规格:48T/96T
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人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA Kit试剂盒

人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA Kit试剂盒

详细信息

货号:CK-E10504

品牌: 原鑫生物

供应商:上海原鑫生物科技有限公司

检测限: /

检测方法: 酶联免疫法双抗夹心法

应用: ELISA

适应物种: 人/动物/植物

样本: 血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织液等

规格: 96T/48T

人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒操作说明 操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。


人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒操作说明 检测试剂注意事项:

1.  此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。

2. 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,

3. 浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。

4. 浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟

5. 若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。

6. 在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。

7. 加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。

8. 试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。


人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒操作说明 操作步骤:

1. 取出试剂盒,于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。

2. 取出酶标板,按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。

3. 空白微孔中加入50μl的样品,空白对照加入50μl的蒸馏水;

4. 在样品孔中加入10μl的生物素;(不含空白对照孔,切忌:生物素只加样品孔!)

5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液;(不含空白对照孔)

6. 将酶标板用封口胶密封后,37℃孵育反应 1小时;(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度)

7. 充分清洗酶标板3-5次,保持各孔有充足的水压;(浓缩洗涤液以1:100的比例与蒸馏水稀释)

8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干;

9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl;(不含空白对照孔)

10. 20-25℃下避光反应15分钟;

11.各孔加入50μl终止液,终止反应;


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