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生化生理检测 - 过氧化物酶(POD)代测检测服务

过氧化物酶(POD)代测检测服务

过氧化物酶(POD)代测检测服务

    测定意义

    过氧化物酶是植物体内重要的呼吸酶类,其活性高低与酚类物质代谢、物抗性密切相关。通过实验掌握提取POD和测定其活性的方法及其原理。过氧化物酶催化H202氧化酚类,生成醌类化合物,此化合物进一步缩合或与其他分子缩合,产生颜色较深的产物。本实验以愈创木酚为底物,过氧化物酶催化H202将愈创木酚氧化生成茶褐色产物,此产物在470nm波长处有最大吸收峰,故可通过测定470nm波长下的吸光度变化得知过氧化物酶的活性。

    操作方法

    1.酶液制备

    称取植物材料1g,加入20mmol/LKH2PO4溶液5m1,于研钵中研磨成匀浆,在33000r/min下离心10min,上清液转入25m1容量瓶中,残渣再用5mlKH2PO4溶液提取一次,合并两次上清液,定容,混匀,贮于冷凉处备用。

    2.比色测定

    取光径1cm比色杯2只,于1只中加入已混匀的反应混合液3m1,KH2PO4溶液1ml,作为参比液;另一只中加入反应混合液3ml,酶液1m1(如酶活性过高可稀释之),立即记时并置于分光光度计中。在470nm下测定光密度,每隔1min读数一次,连续测30min,每次测定前重新用对照校准。若气温较低,应适当提高室温,以37℃为最适宜。

    上海原鑫品牌优势

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    抗体:兔多抗、鼠单抗种类丰富,一抗1万余种,二抗100多种;

    重组蛋白:多项发明专利,原核表达系统稳定表达蛋白1000余种。

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