丙酮酸（PA）含量检测试剂盒 Pyruvic Acid (PA) Content Assay Kit 
丙酮酸含量检测试剂盒说明书产品描述：
丙酮酸（Pyruvic Acid）是生物代谢及物质转化的重要中间体，可通过乙醛 CoA 和三羧酸循环实
现体内糖、脂肪和氨基酸间的相互转化，在营养物质代谢过程中起着重要的枢纽作用。丙酮酸分子中
同时具有羰基和羧基两个官能团，除具有羧酸和酮的性质外，还具有 α-酮酸的性质，作为一种基本化
工原料在化学、制药、食品、农业及环保等领域具有广泛应用。
丙酮酸能够与 2,4-二硝基苯肼反应生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中进一步被氧化为棕
红色物质，产物在 520 nm 处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可定量检测丙酮酸的含量。
丙酮酸含量检测试剂盒说明书产品内容图示： 
丙酮酸含量检测试剂盒说明书产品使用说明： 测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆
器、可调式移液器、台式离心机和蒸馏水。 ①组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：（5-10）的比例（建议称取 0.1 g 组织，加
入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴匀浆，室温静置 30 min，8000 g 常温离心 10 min，取上清待测。 ②细菌或细胞：离心收集细菌或细胞到离心管内，按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）
为（500-1000）：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功
率 20%，超声 3 s，间隔 10 s，重复 30 次），室温静置 30 min，8000 g 常温离心 10 min，取上清待测。 ③血清（浆）、培养液等液体样本：按照样本体积（mL）：提取液体积（mL）为 1：（5-10）的比
例（建议 0.1 mL 液体样本加入 1 mL 提取液）处理样本，充分混匀后室温静置 30 min，8000 g 常温离
心 10 min，取上清待测。
丙酮酸含量检测试剂盒说明书测定步骤说明:
①分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长至 520 nm，蒸馏水调零。 ②在 96 孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂。 
吸光值测定：测定 520 nm 处吸光值，记为 A 测定、A 标准和 A 空白，计算∆A 测定=A 测定-A
空白，∆A 标准=A 标准-A 空白。注：空白组只需测定 1-2 次。
标准曲线的建立：以 100、50、25、12.5、6.25、3.125 µg/mL 为横坐标（x），以其对应的∆A 标准
为纵坐标（y），绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将∆A 测定带入公式中得到 x（µg/mL）
丙酮酸含量检测试剂盒说明书丙酮酸含量计算图示： 
注释：V 样：反应体系中加入待测样本的体积，75 μL=0.075 mL；V 提：待测样本总体积，1 mL；
V 液：液体样本的体积，0.1 mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；细菌或细胞数量：
以万计。
丙酮酸含量检测试剂盒说明书注意事项 ①血液样本抗凝剂建议使用肝素钠-氟化钠，抗凝血样品置于冰浴中送检，尽快分离血浆。 ②若 ΔA 测定超出标准线性吸光范围，建议适当增加样本（低于标准下限）或适当稀释（高于标
准上限）后再进行测定，计算时相应修改。
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